脊髓灰質炎病毒2型(PV-2)熒光PCR檢測試劑盒說明書

【產品名稱】

商品名稱：脊髓灰質炎病毒 2 型（PV-2）核酸檢測試劑盒(RT-PCR 熒光探針法)

Name ：Diagnostic Kit for Human Poliovirus type 2 RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)

【包裝規格】48份/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測的咽拭子標本等標本中脊髓灰質炎病毒 2 型 RNA，適用于

脊髓灰質炎病毒 2 型感染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒用一對脊髓灰質炎病毒2型特異性引物，結合一條特異性熒光探針，

用一步法熒光RT-PCR技術對脊髓灰質炎病毒2型RNA進行體外擴增檢測，用于

臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

【試劑組成】

說明：不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融少于 5 次，

有效期 12 個月。

【標本采集】

采集病人的咽拭子標本，應使用采樣拭子，適度拭抹咽后壁和兩側扁桃體部

位，應避免觸及舌部；迅速將拭子放入標本采集管中，旋緊管蓋并密封，以防干燥。

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標

本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區）

1.1樣本前處理

取 100uL 棉拭子標本于 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2RNA 提取

推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產的 RNA 提取試劑盒（離心柱提取

法），請按照試劑盒說明書進行操作。

2. 試劑配制（試劑準備區）

根據待檢測樣本總數，設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性

對照+1 管陽性對照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：

3. 加樣（樣本處理區）

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μl，分別加入相應的反

應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4. PCR 擴增（核酸擴增區）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內；

5.2結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數增長曲線；

可疑：檢測通道 35.0<Ct 值≤37，建議重復檢測，如果檢測通道仍為 35.0<Ct

值≤37，且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；

陰性：樣本檢測結果 Ct 值>37 或無 Ct 值。

7. 質控標準

陰性質控品：無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數生長期，且 Ct 值≤32；

以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

8. 產品性能指標

陰陽性參考品符合率：5 份陽性參考品符合率為 100％；10 份陰性參考品符合率

為 100％。

低檢測限：5.0×102copies/ml。

精密度：批內、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數（CV）均小于等于 3%。

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